1、适用范围和原理

本实验方法是将植入物插入试验动物肌肉内，对试验样品植入物与对照样品植入物的生物学反应进行比较，用于评估肌肉组织对植入材料的生物学反应。对照材料是已确立临床可接受性和生物相容性的医疗器械所采用的医疗器械所采用的材料。

2、试验依据标准

国内：GB/T 16886.6 医疗器械生物学评价 第6部分：植入后局部反应试验；

国外：ISO 10993-6 Biological evalsuation of medical devices—Part 6: Tests for local effects after implantation。

3、样品制备

试验和对照样品的常规制备按3.1的规定，植入物尺寸根据选用的肌肉群的大小来确定。采用家兔脊柱旁肌试验时，采用宽1~3mm、长大约10mm的植入物。样品应制成圆形边缘，两端为光滑球面。或者可手术植入直径10mm、厚度3mm的较大样品。样品应制成圆形边缘，两端钝角修圆。

4、对照样品的选择

对照样品可以为上市对照，也可以依据GB/T 16886.12 附录A 选择阴性对照材料，如PE, 硅树脂、氧化铝、不锈钢。

5、实验动物和植入部位

将植入物植入家兔或其他动物的肌肉组织时，植入部位的大小应满足植入物的要求。每次试验只能使用一种动物，兔脊柱旁肌为首选植入部位，较小的样品也可选用大鼠臀肌或家兔股肌。

6、实验动物使用数量

每一植入期至少采用3只动物，在充足的植入部位植入10个试验样品和10个对照样品。用于评价的试验和对照样品本应至少来自3只不同的动物。

如需要对照材料产生的反应大于最小反应时，可在试验材料的对侧部位植入另外的已知能引起最小组织反应的对照材料。

7、植入步骤

采用家兔脊柱旁肌时，将4个或3个试验材料样品植入每只家兔脊柱一侧肌内，应平行于脊柱，离中线25~50mm,各植入物间隔约25mm，同法在脊柱另一侧植入4个或3个对照材料样品。

8、植入周期

应根据临床可能接触时间，或是持续至相应生物学反应达到或超过某一稳定状态的时间，来确定试验周期，所选择的时间点应进行说明和论证。确保生物学组织反应达到稳定状态。短期一般选择1周和4周。长期一般选择13周和26周。 表1为标准推荐的长期植入观察期选择。

表1. 皮下组织、肌肉、骨长期植入试验观察期选择

9、取样和病理切片制作

到试验终点时，安乐处死动物后，解剖取样。制作病理切片，HE染色。

10 、生物学反应评价

通过记录不同时间点观察到的肉眼和组织病理学反应来评价生物学反应。将试验样品、对照样品或假手术部位的反应进行比较。依据GB/T 16886.6 附录E进行植入后局部生物学反应评分。与上市对照或者音信对照比较，依据下表判定器械的组织反应。

表6. 组织病理学结果判定